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S-TRANS 快速多通道半干转印仪说明书

发布时间:2020-12-08 07:50:55 点击:
快速多通道半干转印仪


 
1. 仪器介绍
电转印是许多研究和诊断实验室常用的技术。传统湿式转印配制试剂以及转印过程需要消耗大量时间,通常需要一个半小时以上。ACE 公司  S-TRANS 快速多通道半干转印仪在保证性能的情况下,大大缩短了蛋白转印时间。使用 S-TRANS 快速多通道半干转印仪,转印时间最快 缩短到 5 min,配套的转印缓冲液提供了较高的转印效率和重现性。S-TRANS 转印系统由主机、半干式转印盒、两极缓冲液和吸水介质组成; 如果一台主机不能满足转印要求, 可以在主机上连接最多两台拓展副机, 副机具备与主机同等的转印功能, 并且副机不需要额外提供电源,  电源和操作都由主机赋予。在工作时主机与副机可以采用堆叠的方式放置, 主机放置于副机之上, 主机与副机间有用于固定的结构, 如果使用 第二台拓展副机,则此副机可以置于最下方位置。
半干式转印盒最多可以容纳两个 Mini(7.0x8.5cm)凝胶。转印时将装配好的三明治复合结构放入转印盒中,  盖上盒盖,  插入转印仪器(操作   详见 3.2),选择或编辑合适的转印程序开始转印(操作详见  3.5)。配套转印试剂盒包括:  S-TRANS 阳极缓冲液、  S-TRANS 阴极缓冲液、 S-TRANS 高效转膜垫片(7.0x9.5 cm)。
如使用硝酸纤维素膜或者 PVDF 膜时需要将膜在阳极液中平衡 15 min 以上,这个步骤通常可以在电泳的过程中同时进行。仪器转印程序的 预设、更改、运行操作简便,多次转印可连续进行。


2. 仪器和试剂概述
S-TRANS 系统仪器和其配套试剂盒可以在 10 min 内完成蛋白质凝胶转印, 快速高效。一个转印盒一次可以有效转印单个 Mini 凝胶(7.0x8.5 cm 或两个 Mini 凝胶。配套试剂盒包含 S-TRANS 阳极和 S-TRANS 阴极缓冲液以及 S-TRANS 高效转膜垫片介质。用户可以选择硝酸纤维 素膜或 PVDF 膜进行转印,使用前需要在阳极液中平衡 15 min 以上。
转印中三明治复合物夹在转印盒中的两个电极板之间。如果主机和两个副机同时运行,  可独立运行转印程序。转印方案可存储,  以供调取使 用。转印程序运行结束时,请丢弃用于此次转印的 S-TRANS 高效转膜垫片。膜和凝胶(如需要) 可立即用于下游应用或保存以供后续实验使 用。主机和副机的转印盒通用,可以自由互换。主机及副机被连接时,其中一台可以在运行期间保持空置。
用户界面为主机的触屏菜单屏幕。菜单屏幕提供简洁的触摸式访问,用户可以由按钮提示完成一系列的转印程序输入和运行。
 
 
3. 仪器使用
S-TRANS 仪器默认程序和其配套试剂盒可为大部分蛋白质提供高效转印。 然而个别蛋白质需摸索不同的转印程序条件,  完成优化后可储存 转印程序。 请勿在该系统中使用不配套的试剂耗材。
3.1 使用配套试剂盒的建议
■ 在转印过程中始终配戴手套,防止凝胶或膜污染。
■ 在电泳后立即转移凝胶,将凝胶在去离子水中浸泡 2 min 以上。
■ 转印所用的硝酸纤维素膜或 PVDF 膜必须充分平衡(15 min 以上); S-TRANS 高效转膜垫片必须充分浸润缓冲液,阳极或阴极端必须分 别使用层配套 S-TRANS 高效转膜垫片,勿增减;  S-TRANS 高效转膜垫片必须两片叠放一起浸润缓冲液,勿分别浸润。
■ 浸润 S-TRANS 阳极缓冲液的 S-TRANS 高效转膜垫片必须用于阳极板一面;浸润 S-TRANS 阴极缓冲液的 S-TRANS 高效转膜垫片必 须用于阴极板一面;转印盒的底为阳极板,转印盒的盖为阴极板。
■ 在同时转印多张膜时,请使用适当的凝胶组合。
■ 如果需要移动膜,请小心使用镊子。
 
3.1.1 S-TRANS 系统转印时, S-TRANS 高效转膜垫片浸润 S-TRANS 阳极缓冲液后铺于盒底, 盒底为阳极板;阳极板的转膜垫片与膜接触, 在膜的上层是凝胶, 在凝胶的上层请用浸润 S-TRANS 阴极缓冲液的 S-TRANS 高效转膜垫片铺垫, 最后用盒盖盖上, 并锁紧插销, 盒盖面的  电极板为阴极。此时一个完整的转印复合物结构装配完成。在装配每一层结构后,请用转印辊小心去除气泡。
 
3.1.2 S-TRANS  系统主机配有两个带盖塑料盒,  用于存放两种缓冲液。请注意目前配备的  S-TRANS 高效转膜垫片只适用于  Mini 凝胶 7.0x8.5 cm)。
请在浸润 S-TRANS 高效转膜垫片时将两片 S-TRANS 高效转膜垫片同时浸润, 切勿分别浸润和铺垫,  以免造成不必要的气泡以及缓冲液的 缺失。
在确认没有凝胶污染的情况下可以回收塑料盒中的缓冲液。已经倒入塑料盒的缓冲液请不要长期放置盒子中,  以免水分散失造成缓冲液成分 变化。
3.2 将装配完毕的转印盒放入主机或副机的抽屉口中。
■ 膜和凝胶堆叠而成的转印三明治复合结构,一旦装配完成请勿倒置转印盒。当转印完毕取出复合物时也不要倒置它。
■ 装配的三明治复合物应放置在底部居中位置。如果只装配一块凝胶,  请将其中心放置于盒底的中心,  并且使 S-TRANS 高效转膜垫片的长边 对应转印盒的长边。如果转印盒内同时转印两块凝胶请将两块凝胶对应盒的两长边中点连线放置,  并且使  S-TRANS 高效转膜垫片的长边对应 转印盒的短边。
■ 请不要在转印三明治结构装配完成后再次移动,这可能会在层间引入空气。 如果三明治必须在放置后移动,建议重新装配三明治结构。
■ 请务必使用配套 S-TRANS 高效转膜垫片介质。
■ 避免向转印盒中添加多余数量的膜、S-TRANS 高效转膜垫片、凝胶等转印结构。 如下图显示了转印盒中转印三明治的正确组装方式。
■ 如果凝胶和 S-TRANS 高效转膜垫片层在装配过程中发生错误,请仔细拆卸组件,以免损坏膜。 重新装配后请使用转印辊小心去除气泡。
■ 如果凝胶和 S-TRANS 高效转膜垫片层需要重新装配,请使用新的 S-TRANS 高效转膜垫片,并重复浸泡过程。
■ 用转印辊挤出气泡时请保证对三明治结构的挤压程度尽可能低,以免挤出过多的缓冲液。

顶部阴极板
S-TRANS 阴极缓冲液浸泡的 S-TRANS 高效转膜垫片

转印膜
S-TRANS 阳极缓冲液浸泡的 S-TRANS 高效转膜垫片
底部阳极板


 

 
将转印三明治结构放置于转印盒的中心, 如结构在盒中稍微偏离中心, 则无需做移动, 放入转印盒后请立即盖上转印盖, 确保电气触点紧密配合 底座的槽。将盒盖上的销锁杆向盒中心拨动并用力按下盒盖,  再放开杆,  盖销插入锁定槽。完成后将转印盒滑入主机盒槽中,  推至接触联锁并锁 定,此时触控屏背景色由亮白色变为灰色。
如主机挂载拓展副机,请优先使用主机转印。本系统要求主机和副机同时插入转印盒,当运行程序时,其中一机可以保持为空。 使用预设方案的转 印程序详情,请参阅下面章节。 注意:如有挂载拓展副机,各机的运行独立。 在主机面板进行操控即可。
当主机挂载拓展副机时, 开启电源开关, 主机即可检索到副机。每台主机仅有一个输出接口, 每台副机分别拥有输入接口和输出接口(用于连接第 二台副机), 其后面板不与主机在同垂直线的接口为副机输入接口, 使用时将主机的输出接口与第一台副机的输入接口连接,  第一副机的输出接 口与第二台副机输入接口连接。一台主机至多可以联机两台副机,正确连接后接线为倾斜状态。
3.3  S-TRANS 系统不建议使用普通转印缓冲液。
转移前无须平衡凝胶,  但为消除不同电泳缓冲体系中凝胶残留缓冲液可能对转印缓冲体系的影响,  请将凝胶在去离子水中浸泡 2 min 以上再进 行转印。
1. 根据试剂瓶上的说明准备阳极和阴极转移缓冲液。
2. 硝酸纤维素膜浸泡于阳极转移缓冲液中,平衡 15 min 以上;  PVDF 膜在激活后再平衡 15 min 以上。
3. 浸润 S-TRANS 高效转膜垫片,  请注意 S-TRANS 高效转膜垫片无须长时间浸润,  只需要在装配三明治结构前浸润即可。浸润 S-TRANS  效转膜垫片后务必不要沥干 S-TRANS 高效转膜垫片,  S-TRANS 高效转膜垫片取出时有少许液体滴入转印盒对转印并无影响,  浸润 S-TRANS 阴极缓冲液的 S-TRANS 高效转膜垫片在最后装配时与 S-TRANS 阳极缓冲液接触对转印并无影响。
■ PVDF 膜浸泡在 100% 甲醇或乙醇中,直到膜是半透明状态后转移至含有 S-TRANS 阳极缓冲液的塑料盒中,确保膜浸没,并平衡 15 min 以上。
■ 膜平衡可以在电泳还未结束之前开始,请注意不要长时间使用 S-TRANS 阳极缓冲液浸泡膜(不要超过 24 h)
■ 主机配有两个塑料盒用于平衡或浸润,使用前需倒入 40 mL 缓冲液。
 
 
 
3.4 转印程序操作
3.4.1 主界面说明及基本操作
接通电源并开机,初始屏幕启动,系统自动进入主屏幕。在主屏幕界面您可以直接进行转印操作。
 
 
 
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